在动物实验以及临床医疗工作中，有时需要把刺激电极、记录电极、损毁电极、给药导管等安置在人或动物脑的特定位置，以及临床脑肿瘤切除等技术的应用都需要对脑肿瘤的位置进行定位，才能实施动物实验及临床治疗活动。这种定向的技术称为脑立体定位术。 其基本原理在于利用某些颅外标记（如前囟、后囟、外耳道、眼眶、矢状缝等）与颅内结构相对的固定位置关系。在确定了颅外标记之后，就可按脑立体定位图谱所提供的数据进行定位操作。本实验以引导大鼠“中枢呼吸神经元自发放电”为例，了解立体定位技术。
实验对象和用品:
大鼠（Sprague Dawley）。示波器、脑立体定位仪（西北光学仪器厂生产）、监听音箱、哺乳动手术器械一套、微电放大器（日本光电公司产：8201—微电放大器）、金属屏蔽箱、开颅电辟钻、玻璃微电极、校验电极、纱布、脱脂棉、2%戊巴比妥钠、生理盐水、液体石蜡、骨蜡、2ml、 5ml注射器各一个。
实验步骤和项目
1．校验仪器:
首先将放置在屏蔽箱内的脑立体定位仪上的两个滑道，按实验的要求调节好合适的高度后。然后在用水平尺调正好两个滑道的前后、左右水平。这时在把安置在滑道上的电控微推进器（或手动微推进器）按上面的刻度调节垂直。
确定脑立体定位零点，大鼠脑定位的系统大致分两种：（1）用耳间线中心定位，首先将两个耳棒尖端在定位仪滑道中间部位彼此相接触（两个耳棒读数相同），旋紧镙丝。然后取下一侧耳棒，另一耳棒不动。将微电极推进器移动到耳棒上方固定，取一校验电极固定于推进器电极棒上，调节移动推进器，使校验电极尖端与耳棒尖端的中心点相触，即为A点（即耳间线中心点），并记下刻度值。然后，将推进器水平移动到门齿钩的上方，向下推进2.4cm后，将门齿钩平面与校验电极尖端相触。这时就定出外耳道中心点与门齿牙板上面上沿之间的水平切面0点，记为H0。这时，动物的前囟和后囟基本处在一个水平面上，相差0~0.1mm。另外，规定耳间线中心点以上为+，向下为-；向嘴侧为+，向尾侧为-。
（2）如果用颅骨标志定位（常用前囟），即以前囟为嘴尾侧0点，由前囟向嘴侧为+，向尾侧为-，其它与上面定位方法相同。（图 大鼠脑定位坐标示意图）。
图 SD.大鼠脑定位坐标示意图
A外耳道中心点 AC前连合 B前囟 F0通过外耳道中心点的冠状切面0点H0通过外耳道中心点的水平切面0点 Pc后连合 上切牙平面比耳间线平面低2.4，前后囟基 本处于同一平面。
2．实验仪器连接:（如图 所示）
图 脑立体定位实验仪器连接示意图
3．操作步骤：
（1）麻醉及手术：选体重270—310g大鼠一只，以2%戊巴比妥钠（40mg/kg）腹腔注射麻醉。待动物麻醉以后，给大鼠颈部行气术管术。如果动物呼吸道有分泌物，可用接有φ1mm聚氯乙酰管的注射器从气管上口插入气管内3—4cm，用注射器将分泌物抽出来即可，以保现动物的呼吸道畅通。
（2）大鼠头部固定： 将大鼠的门齿固定于脑定位仪牙齿固定器上，然后把一侧的耳捧推入动物的外道后，使动物的头在处于两滑道正中。再将另一耳捧推入另一侧的外耳道。这时观察两个耳棒的刻度一致后，将两耳棒上的固定螺丝扭紧，在将牙齿固定器上压鼻环压下后扭紧（鼻环、耳棒的松紧度调节适宜为好）。
（3）大鼠臂旁内侧核定位： 剪去动物头部毛，沿矢状缝作一3cm长的皮肤切口，分离皮下组织，暴露前囟中心和人字缝及矢状缝。
确定标准中线：将测试电极向下移动到矢状缝上方后，再前后移动电极，使的移动电极平面与矢状缝平行即可。
调整颅骨顶水平面：在矢状缝两边，定两个与矢状缝等距离两个点，使推进器上的测试电极分别下降到两个点时，其下降的刻度值一致即可。
大鼠臂旁内侧核定位：在前囟后9mm, 矢状缝旁开1.97mm两点间垂直连线处（如图 所示）。用开颅电辟钻在颅骨上，钻以直径2mm园孔，然后用钟表镊子小心撕开硬脑膜，切勿损伤脑组织。如果出血，用骨蜡止血。然后滴加30℃的液体石腊后，敷以小棉球。
图 大鼠臂旁内侧核定位图
臂旁内侧核dpb 臂旁腹侧核vpb 小脑上脚（结合臂）SCP
（4）引导大鼠呼吸神经元的自发放电信号：选取一充灌好的玻璃微电极，固定于微推进器的电极杆上，将微放探头输入端正极与微电极相连，接地与动物皮肤相连。打开示波器、微电极放大器、监听电源后，把示波器放大器的灵敏度调节至0.2 mv/cm,扫描速度1cm/50ms，然后把微电极放大器上off 、×1、output、Hum filter键按下，这时即可听见监听器由于输入端空放造成噪声。然后，将固定有微电极的推进器上的电极，对准颅骨的开孔口正中上方后，向下推进至电极尖端接触皮层表面时。监听器的噪声消失，这时电极尖端就处于皮层上方的零点部位，然后按实验二内容里微电极阻抗测试方法，测试电极阻抗值。如阻抗值在10MΩ左右。即可开始将微推进器向下降至5.2cm深处后，用1μm/s速度向下推进，在5.2~6.2mm深度范围搜寻呼吸神经元放电。如果听到或看到有节律的神经元电活动信号的声音（与呼吸频率一致），而且在示波器荧光屏上有间隔一致的神经元放电，即是大鼠呼吸神经元的自发放电信号活动。
用脑定位仪作脑内刺激或记录神经元电活动，通常最后都要作组织学切片定位，以确定电极所在位置。
（李 强）
